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肺炎支原體的培養

作者: 發布于:2017-11-8 9:10:13 點擊量:

 一、標本采集

支原體常侵及人和動物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取樣后放入2~3ml支原體液體培養基的小管中,或取其分泌液,若標本是組織塊,可在滅菌乳缽或玻璃勻漿后接種,取樣后應盡快接種培養。
 
二、分離培養
1、支原體固體培養基接種法轉動拭子將標本液體盡量擠出,用無菌滴管吸1~2滴接種在平皿上蓋好,用L棒涂抹或傾斜轉動平皿使標本均勻分布,置37℃孵育。
2、支原體半固體培養基接種法混種法:在制備半固體培養基時,培養基加熱溶化,溫度降至50℃時,添加動物血清、酵母浸液及青霉素后混勻,待冷卻至37~40℃時,用無菌滴管吸取標本 0.5~1ml加入培養基中,充分混勻,凝固后置37℃孵育。
3、穿刺接種法:方法同細菌接種法。
 
三、結果觀察 
  絕大多數支原體為兼性厭氧,少數在含10% CO2和相對濕度80~90%的大氣環境中生長良好。支原體生長緩慢,多數于3~4d長出菌落,少數于1~2w方長出典型菌落,在平皿固體培養基上生長的菌落呈"油煎蛋"狀,邊緣不整齊。
 
四、附錄
  糖酵解培養基(肺炎支原體培養基)
  基礎培養基 70ml
  馬(或牛血清) 20ml
  25%酵母浸液 10ml
  0.4%酚紅 0.5ml 
  1%醋酸鉈 2.5ml
  青霉素10000IU/ml 5.0ml
  調pH 7.8 



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